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Estudios cromosónicos clásicos y moleculares en Hippeastrum Herb. (Amaryllidaceae) )

Por: Cerutti, Juan carlos.
Colaborador(es): Daviña, Julio Rubén, Dir | Moscone, Eduardo Alberto, co-Dir.
Tipo de material: materialTypeLabelLibroEditor: Córdoba: [s./n.], 2012Descripción: 144 h. ils. col.; grfs.; tbls.Tema(s): TESIS | HIPPEASTRUM HERB | AMARYLLIDACEAE | FLORICULTURA | BIOLOGIA VEGETAL | FILOGENETICA | HORTICULTURA ORNAMENTAL | PLANTAS EXOTICAS NATIVAS | GENOMAS | CITOGENETICA | CIENCIAS BIOLOGICASNota de disertación: Tesis (Grado Doctor en Ciencias Biológicas)--Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Lugar de Trabajo: Laboratorio de Citogenética Vegetal. Instituto de Biología Subtropical (IBS-UNaM-CONICET). Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal (IMBIV-CONICET)-2012 Resumen: RESUMEN Hippeastrum Herb. es un género de la familia Amaryllidaceae que contiene casi 60 especies nativas de América tropical y subtropical, con amplia diversidad en el Este de Brasil y los Andes orientales de Bolivia, Perú y Argentina. La delimitación taxonómica del género es incierta, existen híbridos y variedades artificiales obtenidos de manera indiscriminada desde tiempos remotos. No solo presenta interés ornamental sino que es ampliamente estudiado por la presencia de alcaloides de utilidad farmacéutica. Con el objetivo primordial de obtener marcadores cromosómicos que sirvan como diagnóstico citotaxonómico de las especies y contribuyan con la reconstrucción de la evolución cariotípica en el género, se aplicaron metodologías de tinción convencional, bandeo fluorescente CMA/DA/DAPI, impregnación con AgNOs e hibridación /n sita fluorescente (FISH) con sondas de ADNr SS y 45S en 19 especies del género. Los resultados indican que Hippeastrum es cromosómicamente estable con x=ll como número básico y mayoría de especies diploides (2n=2x=22), aunque hay poliploides de niveles 3x, 4x, y 5x en el 26% de las especies estudiadas y se encontraron cromosomas B en 10% de las accesiones analizadas. Los cromosomas en promedio son grandes (C=6,71um), determinando longitudes del complemento monoploide importantes (LCM=59,61-86,60um). Los cariotipos son bimodales y asimétricos, pertenecen mayormente a la categoría de asimetría 3B y responden a tres fórmulas cariotípicas monoploides: 4m+4sm+3st (53%), 4m+3sm+4st (37%) y 3m+4sm+4st (10%). Los cromosomas pequeños (m-sm) y grandes (sm-st) muestran patrones evolutivos relativamente diferentes, afectando de manera desigual a la asimetría cariotípica. En los pequeños el incremento de longitud tiende a ser equibraquial, sin modificar notablemente el índice centromérico (IC) y con efecto limitado sobre la asimetría intracromosómica. En los grandes tiende a ser dirigido hacia los brazos largos, disminuyendo el IC y afectando en mayor grado a la asimetría cariotípica. Los patrones de distribución de marcadores cromosómicos moleculares son generalmente conservados. Toda la heterocromatina observada es rica en pares de bases GC (CMA+/DAPI-) y representa el 0,21-0,99% del tamaño genómico. La heterocromatina constitutiva se presenta en brazos cortos de cromosomas-SAT, que son los st más pequeños del complemento, donde abarca todo el satélite distal y una parte del brazo proximal a la constricción secundaria. También, se revelan bloques CMA* en telómeros de brazos largos de cromosomas sm-st, que suelen mostrarse heteromórfícos. No se observan bandas intersticiales o de naturaleza química diferente. Por otro lado, respecto de los genes que codifican el ARN ribosómico, encontramos un locus de ADNr 5S por complemento monoploide, ubicado en la región subterminal del brazo largo del cromosoma 8 principalmente, que en 71% de las especies se asocia contiguamente con un locus de ADNr 45S terminal, conformando un par de loci de ADNr 5S-45S sinténicos. Los genes de ARNr 45S conforman patrones más variables en cuanto a número, tamaño y posición de loci, y pueden encontrarse principalmente en los cromosomas 7-11 del complemento monoploide. Las bandas CMA+ descriptas anteriormente colocalizan con sitios de ADNr 45S de tamaño medio o grandes, y los sitios menores solo se revelan por FISH. En los diploides hay entre 2 y 7 clusters de ADNr 45S, algunos de los cuales constituyen loci homólogos, y en poliploides hay de 3 a 16 señales dependiendo del nivel de ploidía. Las regiones organizadoras nucleolares (NORs) son aquellos loci conformados por mayor cantidad de cistrones ribosomales, cuestión que se infiere de su tamaño, y solo se diferencia una Ag-NOR por genoma monoploide. Los nucléolos interfásicos varían en tamaño y número, pero la condición más frecuente es la presencia de dos nucléolos de diámetro medio. Los rearreglos estructurales más frecuentemente detectados son inversiones pericéntricas y translocaciones, aunque también se registran inserciones, deíeciones y transposiciones de cistrones ribosomales (ADNr 45S), a partir de los cuales se obtuvo una aproximación inicial de la evolución cromosómica en el género. Se propone el cariotipo primitivo de Hippeastrum y la clasificación de los cromosomas en cinco tipos básicos y sus derivados, según su morfología y la presencia de marcadores citomoleculares. Se evalúa la similitud cariotípica entre las especies estudiadas a partir de un análisis de agolpamiento en conglomerados y se discute la filogenia general de Hippeastrum.
Tipo de ítem Ubicación actual Signatura Estado Fecha de vencimiento Código de barras
Tesis de  posgrado Tesis de posgrado Biblioteca Luti
B 528 - HEMEROTECA (Navegar estantería) Disponible B528

Tesis (Grado Doctor en Ciencias Biológicas)--Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales.
Lugar de Trabajo: Laboratorio de Citogenética Vegetal. Instituto de Biología Subtropical (IBS-UNaM-CONICET). Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal (IMBIV-CONICET)-2012

RESUMEN
Hippeastrum Herb. es un género de la familia Amaryllidaceae que contiene casi 60 especies nativas de América tropical y subtropical, con amplia diversidad en el Este de Brasil y los Andes orientales de Bolivia, Perú y Argentina. La delimitación taxonómica del género es incierta, existen híbridos y variedades artificiales obtenidos de manera indiscriminada desde tiempos remotos. No solo presenta interés ornamental sino que es ampliamente estudiado por la presencia de alcaloides de utilidad farmacéutica.
Con el objetivo primordial de obtener marcadores cromosómicos que sirvan como diagnóstico citotaxonómico de las especies y contribuyan con la reconstrucción de la evolución cariotípica en el género, se aplicaron metodologías de tinción convencional, bandeo fluorescente CMA/DA/DAPI, impregnación con AgNOs e hibridación /n sita fluorescente (FISH) con sondas de ADNr SS y 45S en 19 especies del género.
Los resultados indican que Hippeastrum es cromosómicamente estable con x=ll como número básico y mayoría de especies diploides (2n=2x=22), aunque hay poliploides de niveles 3x, 4x, y 5x en el 26% de las especies estudiadas y se encontraron cromosomas B en 10% de las accesiones analizadas. Los cromosomas en promedio son grandes (C=6,71um), determinando longitudes del complemento monoploide importantes (LCM=59,61-86,60um). Los cariotipos son bimodales y asimétricos, pertenecen mayormente a la categoría de asimetría 3B y responden a tres fórmulas cariotípicas monoploides: 4m+4sm+3st (53%), 4m+3sm+4st (37%) y 3m+4sm+4st (10%). Los cromosomas pequeños (m-sm) y grandes (sm-st) muestran patrones evolutivos relativamente diferentes, afectando de manera desigual a la asimetría cariotípica. En los pequeños el incremento de longitud tiende a ser equibraquial, sin modificar notablemente el índice centromérico (IC) y con efecto limitado sobre la asimetría intracromosómica. En los grandes tiende a ser dirigido hacia los brazos largos, disminuyendo el IC y afectando en mayor grado a la asimetría cariotípica.
Los patrones de distribución de marcadores cromosómicos moleculares son generalmente conservados. Toda la heterocromatina observada es rica en pares de bases GC (CMA+/DAPI-) y representa el 0,21-0,99% del tamaño genómico. La heterocromatina constitutiva se presenta en brazos cortos de cromosomas-SAT, que son los st más pequeños del complemento, donde abarca todo el satélite distal y una parte del brazo proximal a la constricción secundaria. También, se revelan bloques CMA* en telómeros de brazos largos de cromosomas sm-st, que suelen mostrarse heteromórfícos. No se observan bandas intersticiales o de naturaleza química diferente. Por otro lado, respecto de los genes que codifican el ARN ribosómico, encontramos un locus de ADNr 5S por complemento monoploide, ubicado en la región subterminal del brazo largo del cromosoma 8 principalmente, que en 71% de las especies se asocia contiguamente con un locus de ADNr 45S terminal, conformando un par de loci de ADNr 5S-45S sinténicos. Los genes de ARNr 45S conforman patrones más variables en cuanto a número, tamaño y posición de loci, y pueden encontrarse principalmente en los cromosomas 7-11 del complemento monoploide. Las bandas CMA+ descriptas anteriormente colocalizan con sitios de ADNr 45S de tamaño medio o grandes, y los sitios menores solo se revelan por FISH. En los diploides hay entre 2 y 7 clusters de ADNr 45S, algunos de los cuales constituyen loci homólogos, y en poliploides hay de 3 a 16 señales dependiendo del nivel de ploidía. Las regiones organizadoras nucleolares (NORs) son aquellos loci conformados por mayor cantidad de cistrones ribosomales, cuestión que se infiere de su tamaño, y solo se diferencia una Ag-NOR por genoma monoploide. Los nucléolos interfásicos varían en tamaño y número, pero la condición más frecuente es la presencia de dos nucléolos de diámetro medio.
Los rearreglos estructurales más frecuentemente detectados son inversiones pericéntricas y translocaciones, aunque también se registran inserciones, deíeciones y transposiciones de cistrones ribosomales (ADNr 45S), a partir de los cuales se obtuvo una aproximación inicial de la evolución cromosómica en el género. Se propone el cariotipo primitivo de Hippeastrum y la clasificación de los cromosomas en cinco tipos básicos y sus derivados, según su morfología y la presencia de marcadores citomoleculares. Se evalúa la similitud cariotípica entre las especies estudiadas a partir de un análisis de agolpamiento en conglomerados y se discute la filogenia general de Hippeastrum.

Texto en español
Abstract en español e inglés

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